溴化乙錠溶液(EB,1mg/ml)
溴化乙錠(Ethidium Bromide,EB)分子式為 C21H20BrN3,分子量為394.31,是一種非常靈敏的熒光染色劑,用于觀察瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中的 DNA,302nm紫外光透射儀激發(fā)并放射出橙紅色信號(hào)。溴化乙錠具有一定的毒性,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)對(duì)含EB的溶液進(jìn)行凈化處理再行棄置,避免污染環(huán)境。
Ethidium Bromide(1mg/ml) 10ml RT 避光
自備材料:
1、 電泳緩沖液(如 TAE、TBE 等)
2、 微波爐
3、 紫外分析儀或凝膠成像系統(tǒng)
操作步驟(僅供參考):
1、將50ml瓊脂糖凝膠溶液(濃度一般為0.8~2%)在微波爐中融化。
2、加入50~100μl Ethidium Bromide(1mg/ml),輕輕搖勻避免氣泡。
3、冷卻至50~60℃不燙手時(shí)倒膠,待瓊脂糖凝膠*凝固,拔出梳子并置于電泳緩沖液中,上樣電泳。
4、紫外分析儀或凝膠成像系統(tǒng)下觀察并拍照或記錄。
1、凝膠厚度一般不超過(guò) 0.5cm,凝膠太厚會(huì)影響檢測(cè)的靈敏度。
2、通過(guò)凝膠電泳回收DNA片段時(shí),應(yīng)避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于紫外線下。
3、EB有一定毒性,對(duì)皮膚眼睛有一定刺激,請(qǐng)小心操作。
4、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期:24 個(gè)月有效。