甲基磺酸乙酯是化學(xué)誘變劑的其中一類
化學(xué)誘變技術(shù)是指利用一些化學(xué)物質(zhì)提高生物的自然突變率,這些化學(xué)物質(zhì)就叫做“化學(xué)誘變劑”。其特點(diǎn)有:可操作性強(qiáng),簡(jiǎn)單易行;特異性較強(qiáng),能誘變定位到DNA上的某些堿基;后代較易穩(wěn)定遺傳,一般到F3代就可穩(wěn)定;應(yīng)用于遺傳標(biāo)記,是細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)。
誘變劑主要包括5類,他們的特點(diǎn)、機(jī)理和應(yīng)用如下:
1、烷化劑:能使一些堿基烷基化,比如使鳥(niǎo)苷酸甲基化,影響mRNA的轉(zhuǎn)錄,從而使蛋白質(zhì)的表達(dá)紊亂,使得蛋白質(zhì)重組,而改變了性狀。臨床上應(yīng)用此類物質(zhì)作為抗癌藥物,具有強(qiáng)烈殺傷癌細(xì)胞的作用,所以在應(yīng)用在于植物上時(shí),也要注意他的強(qiáng)烈殺傷性。
主要有:
甲基磺酸乙酯(EMS),是
常用的誘變劑,我們?cè)米髡婢倪z傳標(biāo)記,誘變率很高。常用濃度0.05-0.5mol/L,作用時(shí)間5-60min。該物質(zhì)具有強(qiáng)烈致癌性和揮發(fā)性,可用5%硫代硫酸鈉作為終止劑和解毒劑。
硫酸二乙酯(DMS),也很常用,但由于毒性太強(qiáng),目前很少使用,作用機(jī)理和使用方法和EMS基本相同。屬于劇毒品。
乙烯亞胺,生產(chǎn)的較少,很難買到。只要用于大量誘變育種用,使用濃度:0.0001-0.1%,高度致癌性!使用時(shí)需要使用緩沖液配置。
鹽酸氮芥,用于抗癌藥物,可以從藥店買到,但有些地方必須有主任醫(yī)師的處方。
一般是針劑,稍加稀釋即可使用,作用時(shí)間5-10min,可用甘氨酸作為終止劑和解毒劑。
環(huán)磷酰胺、亞硝基胍等物質(zhì)也可作為誘變劑使用,但較少使用。
2、堿基類似物:分子結(jié)構(gòu)類似堿基,導(dǎo)致DNA復(fù)制時(shí)產(chǎn)生錯(cuò)配,mRNA轉(zhuǎn)錄紊亂,功能蛋白重組,表型改變。該類物質(zhì)毒性相對(duì)較小,但負(fù)誘變率很高,往往不易得到好的突變體。主要有:6-溴尿嘧啶、6-BudR、馬來(lái)酰肼、2-氨基嘌呤等,同樣屬于抗癌藥物,可到藥店買到,稍加稀釋即可使用。
3、嵌入劑:是分子生物學(xué)比較常用的一類,誘導(dǎo)率較高。原理是這類分子的大小正好可以嵌入堿基分子中,導(dǎo)致錯(cuò)配。常用的:溴化乙錠(EB),高致癌性!
4、 無(wú)機(jī)化合物:比較容易得到,效果一般,危險(xiǎn)性較小。常用:氯化鋰,白色粉狀,使用時(shí)配成0.1-0.5%的溶液,作用30min-2d。
亞硝酸:沒(méi)有現(xiàn)成商品,由于該物質(zhì)易分解,所以現(xiàn)配現(xiàn)用。常用亞硝酸鈉和鹽酸制取,將亞硝酸鈉配成0.01-0.1mol/L的濃度,使用時(shí)加入等濃度等體積的鹽酸即可。
過(guò)氧化氫:又名雙氧水,效果不好,所以很少用到。
5 其他:鹽酸羥胺,一種還原劑,作用于C上,是G-C變?yōu)锳-T。也較常用,可以買到。使用濃度:0.1-0.5%,作用60min-2h。較便宜。
生物堿類:如長(zhǎng)春堿、秋水仙堿、喜樹(shù)堿等。
以上的誘變劑同時(shí)又是致癌物!使用時(shí)必須小心。通常用來(lái)浸種,好的方法是將誘變劑加到組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中,誘變率高。