CCK-8試劑盒實驗原理:本實驗采用雙抗體夾心ELISA法。向預先包被了抗體的酶標孔中加入樣本,再加入生物素標記的識別抗原,在三十七度下孵育三十分鐘,兩者與固相抗體競爭結合形成免疫復合物,經PBST洗滌除去未結合的生物素抗原,然后加入親和素-HRP,親和素-HRP與生物素抗原結合,洗滌后結合的HRP催化TMB成藍色,隨后在酸的作用下轉化成黃色,在一定波長下有吸收峰,吸光值與樣本中抗原的濃度成負相關。
CCK-8試劑盒標本收集需要注意的問題:
1、收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內毒素試管。
2、標本應清澈透明,懸浮物應離心去除。
3、血清和血漿避免使用溶血,高血脂標本。
4、可根據標本的實際情況,做適當倍數稀釋(建議做預實驗,以確定稀釋倍數)。
5、標本收集后若不及時檢測,需按一次使用量分裝, 凍存于二十度到零下八十度的電冰箱內,避免反復凍融。
6、收集標本時,應該做好防護措施(此如戴手套,護目鏡等),認為所有標本都具有一定的潛在危險性。
7、收集標本,盡量做到雙份的用量,避免一次實驗失敗,重復實驗時標本缺失,從而耽誤實驗進程。
8、樣本處理應該在生物安全柜里面,并且正確使用生物安全柜。
CCK-8試劑盒安全操作事項:
1、不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
2、實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3、避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。