免疫膠體金銀細(xì)胞化學(xué)染色的固定劑選擇 |
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詳細(xì)介紹 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
免疫膠體金銀細(xì)胞化學(xué)染色的固定劑選擇 免疫膠體金銀染色和其它免疫細(xì)胞化學(xué)方法一樣,要想得到好的染色效果,關(guān)鍵取決于標(biāo)本處理是否合適,只有使抗原性及組織結(jié)構(gòu)保存的好,才能使以后的染色成功成為可能,其次要用高特異性和價(jià)的一抗,選擇合適的稀釋度。由于免疫組化方法廣泛應(yīng)用于不同的生物學(xué)科,所要檢出的抗原種類繁多,性質(zhì)也各不相同。因此,不可能有一種適用于所有抗原的固定劑,而是根據(jù)不同的抗原性質(zhì)區(qū)別對(duì)待。根據(jù)我們使用的固定劑介紹如下,供參考。 一、固定劑的選擇及固定時(shí)間(詳見(jiàn)表5-9) ?。?)Karovsky's 液pH7.3。 ?。?)PAP液(Periodate—lysine – paraformaldehyde fixative) 配制見(jiàn)附錄一。 表5-9 各種抗原固定劑的選擇及固定時(shí)間
二、切片的處理與粘附。 免疫組化染色過(guò)程較長(zhǎng),洗的次數(shù)很多,而且均在振蕩洗滌,抗原片附貼不緊,往往在zui后的時(shí)刻,還沒(méi)有等顯色就會(huì)脫落導(dǎo)致前功盡棄,這個(gè)環(huán)節(jié) 雖小卻會(huì)影響大局,因此,為了保證切片染色成功必須把切片處理好,解除掉片的后顧之憂 |