CCK-8試劑盒是檢測細胞增殖、細胞毒性的試劑盒,為MTT法的替代方法,試劑盒中采用自己開發(fā)的水溶性四唑鹽-WST-8,CCK-8試劑盒用于藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗。
CCK-8試劑盒的性能特點:
1.CellCountingKit-8簡稱CCK-8試劑盒,是一種基于WST-8的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。
2.CCK-8試劑中含有WST–8:化學名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽],它在電子載體的作用下被細胞線粒體中的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數(shù)目呈線性關(guān)系。
3.WST-8是MTT的一種升級替代產(chǎn)品,和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點。首先,MTT被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液來溶解;而WST-8和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan都是水溶性的,可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次,WST-8產(chǎn)生的formazan比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan更易溶解。再次,WST-8比XTT和MTS更加穩(wěn)定,使實驗結(jié)果更加穩(wěn)定。另外,WST-8和MTT、XTT等相比線性范圍更寬,靈敏度更高。
4.WST-8和WST-1相比,檢測靈敏度更高,更易溶解,并且更加穩(wěn)定。
5.本試劑盒可以用于細胞因子等誘導的細胞增殖檢測,也可以用于抗癌藥物等對細胞有毒試劑誘導的細胞毒性檢測,或一些藥物誘導的細胞生長抑制檢測。
6.本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經(jīng)配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,無須再進行任何配制等操作。無須使用同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細胞,不必收集細胞,也不必采用額外的步驟去溶解formazan。可以用于大批量樣品的檢測。
7.酚紅和血清對本試劑盒的測定無明顯影響。
8.WST-8對細胞無明顯毒性。加入WST-8顯色后,可以在不同時間反復用酶標儀讀板,使檢測時間更加靈活,便于找到*測定時間。
9.關(guān)于不同細胞增殖和細胞毒性檢測試劑盒的比較和選擇。
10.本試劑盒可以測定100個樣品。