| 更新時(shí)間： | 2018-02-06 |
| 型 號(hào)： | |
| 所屬分類： | 常用試劑 |
| 報(bào) 價(jià)： |  |
胰蛋白酶-EDTA溶液（0.05%:0.02%,含酚紅）產(chǎn)品簡介：胰蛋白酶（Trypsin）是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后，小腸內(nèi)的腸肽酶會(huì)活化該酶原，形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特點(diǎn)在于已經(jīng)活化的胰蛋白酶，能夠繼續(xù)活化更多胰蛋白酶原，這種過程即自動(dòng)催化。胰蛋白酶在小腸工作，它會(huì)將蛋白質(zhì)水解為肽，進(jìn)而分解為氨基酸，其Z適溫度約為 37℃。
研謹(jǐn)生物Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚紅)由 0.05%胰酶、0.02%EDTA、
少量酚紅等組成，經(jīng)過濾除菌。本試劑可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化，或者一些組織的消化，通常室溫下 1～2min 左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。
產(chǎn)品組成：
Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚紅) 100ml -20℃
自備材料：
1、 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液
2、 顯微鏡
3、 離心機(jī)
操作步驟(僅供參考)：
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min，
不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量
去除胰酶細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化
不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
注意事項(xiàng)：
1、 盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù)，以免失效。
2、在使用 Trypsin-EDTA solution 過程中，要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。3、Trypsin-EDTA solution 消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長，否則細(xì)胞鋪板后生長狀況會(huì)較差。
4、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期： 12 個(gè)月有效。
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